Таблица 1. Протоколы иммобилизации белка-лиганда (белок А), выполненные в соответствии с рекомендациями фирм-производителей для чипов СМ5 и CMD500M.
|
№ |
Процедура |
CM5 |
CMD500M |
|
1 |
Активация поверхности |
7 мин, 10 мкл/мин, 0.2 М EDC/0.05 М NHS |
10 мин, 5 мкл/мин, 0.2 М EDC/0.05 М NHS |
|
2 |
Иммобилизация белка-лиганда |
7 мин, 5 мкл/мин, лиганд 100 мкг/мл в 10 мМ ацетатном буфере (рН 4.5) |
10 мин, 5 мкл/мин, лиганд 100 мкг/мл в 10 мМ ацетатном буфере (рН 4.5) |
|
3 |
Инактивация поверхности |
7 мин, 10 мкл/мин, 1 М этаноламин-HCl (pH 8.5) |
15 мин, 5 мкл/мин, 1 М этаноламин-HCl (pH 8.5) |
|
4 |
Рабочий буфер |
HBS-EP+ (рН 7.4) |
dd H2O |
|
5 |
Уровень иммобилизации белка-лиганда |
3000 RU |
3400 RU |