Протокол препаративного выделения фракций ЛНП и ЛВП из плазмы крови человека
##plugins.themes.bootstrap3.article.main##
Аннотация
В патогенезе атеросклероза, основной причины сердечно-сосудистых заболеваний, включая ишемическую болезнь сердца и инсульт, участвуют липопротеины плазмы крови, которые различаются по составу белков и липидов, размеру, заряду и функциям. В настоящее время для выделения липопротеинов широко применяются хроматографические методы, в частности гель-фильтрация (SEC). В данной статье мы приводим протокол препаративного выделения фракций липопротеинов низкой плотности (ЛНП) и липопротеинов высокой плотности (ЛВП) из плазмы крови человека с помощью гель-хроматографии. Для определения границ зон элюции аполипопротеинов А-1 и B-100, маркеров ЛВП и ЛНП, соответственно, мы использовали жидкостную хроматографию с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS) с кросс-валидацией методом иммуноферментного анализа (ИФА). Полученные с помощью SEC фракции липопротеинов могут быть использованы для различных исследований, имеющих научно-прикладное значение.
##plugins.themes.bootstrap3.article.details##
Библиографические ссылки
- Tsukahara, T., Tsukahara, R., Haniu, H., Matsuda, Y., & Murakami- Murofushi, K. (2015). Cyclic phosphatidic acid inhibits the secretion of vascular endothelial growth factor from diabetic human coronary artery endothelial cells through peroxisome proliferator-activated receptor gamma. Molecular and Cellular Endocrinology, 412, 320-329. DOI
- Jonas, A., & Phillips, M.C. (2008). Lipoprotein structure. In Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and Membranes (D.E. Vance and J.E. Vance eds.) Elsevier, pp. 485-506. DOI
- Yang, L., Fan, B., Yang, K., & Zhu, H. (2012). A simple and sensitive method for lipoprotein and lipids profiles analysis of individual micro-liter scale serum samples. Chemistry and Physics of Lipids, 165(2), 133-141. DOI
- Blanchard, V., Garçon, D., Jaunet, C., Chemello, K., Billon-Crossouard, S., Aguesse, A., Garfa, A., Famchon, G., Torres, A., Le May, C., Pichelin, M., Bigot-Corbel, E., Lambert, G., Cariou, B., Hadjadj, S., Krempf, M., Bach- Ngohou, K., & Croyal, M. (2020). A high-throughput mass spectrometry-based assay for large-scale profiling of circulating human apolipoproteins. Journal of Lipid Research, 61(7), 1128-1139. DOI
- Collins, L.A., Mirza, S.P., Kissebah, A.H., & Olivier M. (2010). Integrated approach for the comprehensive characterization of lipoproteins from human plasma using FPLC and nano-HPLC-tandem mass spectrometry. Physiological Genomics, 40(3), 208-215. DOI
- Kim, K.W., McCormick, J., Helmering, J., Véniant, M.M., & Wang, M. (2008). An optimized fast-performance liquid chromatography method for analyzing lipoprotein profiles using microliter volumes of serum. Analytical Biochemistry, 376(2), 268-274. DOI
- Hirowatari, Y., & Yoshida, H. (2019). Innovatively established analysis method for lipoprotein profiles based on high-performance anion-exchange liquid chromatography. Journal of Atherosclerosis and Thrombosis, 26(12), 1027-1040. DOI
- McConathy, W.J., Koren, E., Wieland, H., Campos, E.M., Lee, D.M., Kloer, H.U., & Alaupovic, P. (1985). Evaluation of immunoaffinity chromatography for isolating human lipoproteins containing apolipoprotein B. Journal of Chromatography, 342(1), 46-66.
- Liangsupree, T., Multia, E., Metso, J., Jauhiainen, M., Forssén, P., Fornstedt, T., Öörni, K., Podgornik, A., & Riekkola, M.L. (2019). Rapid affinity chromatographic isolation method for LDL in human plasma by immobilized chondroitin-6-sulfate and anti-apoB-100 antibody monolithic disks in tandem. Scientific Reports, 9(1), 11235. DOI
- Multia, E., Liangsupree, T., Jussila, M., Ruiz-Jimenez, J., Kemell, M., & Riekkola, M.L. (2020). Automated on-line isolation and fractionation system for nanosized biomacromolecules from human plasma. Analytical Chemistry, 92(19), 13058-13065. DOI
- Hall, M. (2018). Size exclusion chromatography (SEC). In Biopharmaceutical Processing (G. Jagschies, E. Lindskog, K. Łącki, and P. Galliher eds.) Elsevier, pp. 421-432. DOI