Усиление сигнала SPR биосенсора с помощью золотых наночастиц на примере анализа бета-2-микроглобулина человека
##plugins.themes.bootstrap3.article.main##
Аннотация
Описан высокочувствительный метод детекции низких концентраций целевых белков с помощью усиления сигнала оптического биосенсора на основе поверхностного плазмонного резонанса (SPR) с использованием золотых наночастиц (по типу “сандвич”). В качестве модели биомаркера использован коммерческий белковый препарат бета-2-микроглобулина (B2M), а также препараты поликлональных (Pab) и моноклональных антител (Mab) к B2M. Данный метод анализа вследствие его универсальности и воспроизводимости может быть применён для анализа любых белковых биомаркеров. Подробно рассмотрены экспериментальные протоколы синтеза золотых наночастиц (GNP), получения их конъюгатов с поликлональными антителами (Pab/GNP), спектрофотометрического определения концентрации наночастиц и конъюгатов, ковалентной иммобилизации Mab на поверхности оптического чипа СМ5 биосенсора, регистрации взаимодействий Mab-биомаркер и формирования типа “сандвич” Mab-биомаркер-Pab и Mab-биомаркер-Pab/GNP.
##plugins.themes.bootstrap3.article.details##
Библиографические ссылки
- Homola, J., Vaisocherová, H., Dostálek, J. & Piliarik M. (2005) Multi-analyte surface plasmon resonance biosensing. Methods, 37(1), 26-36. DOI
- Hong, B. & Kang, K.A. (2006) Biocompatible, nanogold-particle fluorescence enhancer for fluorophore mediated, optical immunosensor. Biosensors and Bioelectronics, 21(7), 1333-1338. DOI
- Liu, X., Sun, Y., Song, D., Zhang, Q., Tian, Y., Bi, S., & Zhang, H. (2004) Sensitivity-enhancement of wavelength-modulation surface plasmon resonance biosensor for human complement factor 4. Analytical Biochemistry, 333(1), 99-104. DOI
- Wei, J., Mu, Y., Song, D., Fang, X,, Liu, X,, Bu, L,, Zhang, H., Zhang, G,, Ding, J., Wan,g W., Jin, Q. & Luo, G. (2003) A novel sandwich immunosensing method for measuring cardiac troponin I in sera. Analytical Biochemistry, 321, 209–216. DOI
- Gnedenko, O.V., Mezentsev, Y.V., Molnar, A.A., Lisitsa, A.V., Ivanov, A.S. & Archakov, A.I. (2013) Highly sensitive detection of human cardiac myoglobin using a reverse sandwich immunoassay with a gold nanoparticle-enhanced surface plasmon resonance biosensor. Analytica Chimica Acta, 759, 105-9. DOI
- Dutra, R.F. & Kubota, L.T. (2007) An SPR immunosensor for human cardiac troponin T using specific binding avidin to biotin at carboxymethyldextran-modified goldchip. Clinica Chimica Acta, 376, 114–120. DOI
- Teramura, Y. & Iwata, H. (2007) Label-free immunosensing for alpha-fetoprotein in human plasma using surface plasmon resonance. Analytical Biochemistry, 365(2), 201–207. DOI
- Besselink, G.A., Kooyman, R.P., van Os, P.J., Engbers, G.H. & Schasfoort, R.B. (2004) Signal amplification on planar and gel-type sensor surfaces in surface plasmon resonance-based detection of prostate-specific antigen. Analytical Biochemistry, 333(10), 165–173. DOI
- Kim, M.G., Shin, Y.B. & Jung, J.M. (2005) Enhanced sensitivity of surface plasmon resonance (SPR) immunoassays using a peroxidase-catalyzed precipitation reaction and its application to a protein microarray. Journal of Immunological Methods, 297(1-2), 125-132. DOI
- Wang, M., Wang, L., Wang, G., Ji, X., Bai, Y., Li, T., Gong, S. & Li, J. (2004) Application of impedance spectroscopy for monitoring colloid Au-enhanced antibody immobilization and antibody–antigen reactions. Biosensensors and Bioelectronics, 19(6), 575-582. DOI
- Biacore Sensor Surface Handbook GE Healthcare BR-1005-71 Edition AB 05/2008. P. 39-41.