Алгоритм создания таргетных масс-спектрометрических методов для детекции белков
##plugins.themes.bootstrap3.article.main##
Аннотация
Определение концентраций белков является важной задачей в биологии и медицине, а также используется в клинической лабораторной практике для диагностики заболеваний.
Измерения абсолютных концентраций белков в масс-спектрометрии стали возможны благодаря внедрению в практику внутренних стандартов, которые в точности соответствуют химической структуре измеряемого вещества, но синтезированы с использованием изотопно-меченых молекул. Правильный выбор внутреннего стандарта и систематических подход в разработке методики мониторинга выбранных реакций (Selected Reaction Monitoring, SRM) определяет качество идентификации и точность измерения концентрации таргетного белка. В данной работе суммирован наш опыт по выбору пептидного стандарта для измерения концентрации белков. Результаты представлены в виде алгоритма, который учитывает основные стадии выбора внутреннего стандарта и основные моменты разработки методов детекции и определения концентрации белков
##plugins.themes.bootstrap3.article.details##
Библиографические ссылки
- Aebersold, R., & Mann, M. (2016). Mass-spectrometric exploration of proteome structure and function. Nature, 537(7620), 347–355. DOI
- Chambers, A. G., Percy, A. J., Simon, R., & Borchers, C. H. (2014). MRM for the verification of cancer biomarker proteins: recent applications to human plasma and serum. Expert Review of Proteomics, 11(2), 137–148. DOI
- Wu, H.-Y., Goan, Y.-G., Chang, Y.-H., Yang, Y.-F., Chang, H.-J., Cheng, P.-N., et al. (2015). Qualification and Verification of Serological Biomarker Candidates for Lung Adenocarcinoma by Targeted Mass Spectrometry. Journal of Proteome Research, 14(8). DOI
- Percy, A. J., Tamura-Wells, J., Albar, J. P., Aloria, K., Amirkhani, A., Araujo, G. D. T., et al. (2015). Inter-laboratory evaluation of instrument platforms and experimental workflows for quantitative accuracy and reproducibility assessment. EuPA Open Proteomics, 8, 6–15. DOI
- Hood, C. A., Fuentes, G., Patel, H., Page, K., Menakuru, M., & Park, J. H. (2008). Fast conventional Fmoc solid-phase peptide synthesis with HCTU. Journal of Peptide Science?: An Official Publication of the European Peptide Society, 14(1), 97–101. DOI
- Moskaleva, N., Moysa, A., Novikova, S., Tikhonova, O., Zgoda, V., & Archakov, A. (2015). Spaceflight Effects on Cytochrome P450 Content in Mouse Liver. PloS One, 10(11), e0142374. DOI